Стандартизированная методика, отражающая динамику нарастания, а затем инактивацию тромбино-вой активности в исследуемой крови. Стандартизация начальной фазы процесса свертывания крови достигается использованием гемолизата эритроцитов исследуемого. Немедленно после взятия кровь стабилизируется цитратом натрия, после чего 0,3—0,5 мл ее отливают в отдельную пробирку для приготовления гемолизат-кальциевой смеси. Остальную кровь для получения плазмы центрифугируют при 1500 об/мин. 10 мин. Затем плазму разливают по 0,2 мл в 10 пробирок и помещают в водяную баню при 37°С; для приготовления гемолизат-кальциевой смеси в отлитую кровь добавляют СаС12. В каждую из пробирок с плазмой, находящейся в водяной бане, добавляют по 0,2 мл полученной гемолизаткальци-евой смеси, последовательно через 2, 4, 6, 8, 10, 20, 30, 40, 50, 60 мин. от момента приготовления смеси. В каждой пробирке определяют время свертывания плазмы. Полученные результаты в секундах переводятся в процентные показатели по таблице. По данным АКТ вычерчивают аутокоагулограмму. Восходящая часть кривой АКТ отражает динамику нарастания и максимальную активность тромбо-пластина и тромбина в исследуемой крови. Нисходящая часть кривой характеризует скорость и интенсивность инактивации тромбина за счет действия АТ-Ш и продуктов фибринолиза.
Таким образом АКТ дает представление о состоянии как про-коагулянтного, так и антикоагулянтного звеньев свертывающей системы.
Чтение результатов: А — свертывающая активность на 2-й минуте инкубации (в норме 15,4%). Максимальная активность — МА (100%). Т — время достижения 1/2 МА (3,7 мин), Т2— время достижения МА (10 мин). Время удлиняется при дефиците плазменных факторов, участвующих в свертывании. Время свертывания на 10-й мин. — 10 секунд.
На показаниях АКТ отражается активность XII, XI, IX, VIII, X, V, и II факторов, а также действие прямых антикоагулянтов и не отражается снижение активности VII фактора, участвующего во внешнем механизме образования протромбиназы.

Оценка II фазы свертывания — образования тромбина: определение протромбинового индекса (ПТИ) по A. J. Qwick (1935), отражающего активность факторов протромбинового комплекса (II, VII, IX, X): в цитратную плазму, инкубированную с тромбоплас-тином, добавляется раствор СаС12 и определяется время до образования сгустка фибрина в секундах. Затем высчитывался ПТИ в %. По данным литературы нормальные значения находятся в пределах от 85 до 110%.
Удлинение протромбинового времени или снижение протромбинового индекса при нормальном содержании в плазме фибриногена и нормальном тромбиновом времени наблюдается при дефиците К-витаминозависимых факторов свертывания, который развивается при следующих нарушениях:
— недостаточное образование в кишечнике витамина К — энтероколиты с профузными поносами, кишечные дисбактериозы, геморрагическая болезнь новорожденного;
— недостаточное всасывание витамина К из-за отсутствия желчи в кишечнике при механической желтухе;
— нарушение синтеза К-витаминзависимых факторов в печени при лечении непрямыми антикоагулянтами;
— нарушение синтеза факторов протромбинового комплекса в
Оценка II фазы свертывания — образования тромбина: определение протромбинового индекса (ПТИ) по A. J. Qwick (1935), отражающего активность факторов протромбинового комплекса (II, VII, IX, X): в цитратную плазму, инкубированную с тромбоплас-тином, добавляется раствор СаС12 и определяется время до образования сгустка фибрина в секундах. Затем высчитывался ПТИ в %. По данным литературы нормальные значения находятся в пределах от 85 до 110%.
Удлинение протромбинового времени или снижение протромбинового индекса при нормальном содержании в плазме фибриногена и нормальном тромбиновом времени наблюдается при дефиците К-витаминозависимых факторов свертывания, который развивается при следующих нарушениях:
— недостаточное образование в кишечнике витамина К — энтероколиты с профузными поносами, кишечные дисбактериозы, геморрагическая болезнь новорожденного;
— недостаточное всасывание витамина К из-за отсутствия желчи в кишечнике при механической желтухе;
— нарушение синтеза К-витаминзависимых факторов в печени при лечении непрямыми антикоагулянтами;
— нарушение синтеза факторов протромбинового комплекса в печени при тяжелых поражениях ее паренхимы — острой дистрофии печени, гепатитах, циррозах, паразитарных поражениях; при этом нарушается также синтез других факторов свертывания, которые вырабатываются печенью.
При достаточном содержании факторов протромбинового комплекса для превращения протромбина в тромбин (удлинение протромбинового времени или снижение ПТИ при одновременном удлинении тромбинового времени) действие последнего на фибриноген замедляется под влиянием антикоагулянтов, в основном — гепарина, при очень низком содержании фибриногена в плазме (ниже 1 г/л).

III фаза свертывания крови (образование фибрина) оценивается гравиметрическим методом определения количества фибриногена в плазме (унифицированный метод по Р. А. Рутберг, 1961). К плазме добавляется раствор СаС12, после свертывания фибриногена его высушивают и взвешивают. Нормальные показатели по данным литературы — от 2 до 3,5 г/л.
Гипофибриногенемия наблюдается: 1) при нарушении синтеза фибриногена — при болезнях печени; 2) при остром ДВС-синд-роме в результате усиленного потребления (гипофибриногенемия не развивается, если была исходная гиперфибриногенемия); 3) при врожденных а- или гипофибриногенемиях; 4), при дис-фибриногенемиях.
При снижении уровня фибриногена ниже 1 г/л может возникнуть кровотечение.
Гиперфибриногенемию вызывают: 1) многие острые и под острые воспалительные, иммунные и деструктивные процессы (пневмонии, ревматизм, ревматоидный артрит, гломерулонефрит, инфаркт миокарда и т.д.); 2) хронические и подострые формы ДВС-синд-рома, особенно инфекционно-септического генеза; 3) беременность, гестоз.
В результате гиперфибриногенемии резко увеличивается СОЭ, вязкость крови, но не усиливается гемокоагуляция.

Для выявления продуктов паракоагуляции, свидетельствующих об интенсивной внутрисосудистой коагуляции, проводятся следующие тесты:
Этаноловый тест (по H.Godal et al., 1971), в модификации В. Г. Лычева (1975) с добавлением 50% этанола. Положительный тест (появление желеобразной субстанции или сгустка через 10 мин.) свидетельствует о наличии в исследуемой плазме несвертываемых тромбином комплексов: фибрин-мономеров с ПДФ и самим фибриногеном. Эти продукты появляются при ДВС-синдроме или локальном внутрисосудистом свертывании крови, сопровождающемся лизисом фибрина.
Протаминсульфатный тест по Z. Latallo (1971), в модификации В. Г. Лычева (1975) проводится путем добавления к цитратной бестромбоцитной плазме протамин-сульфата. Положительный тест (образование сгустка или геля) свидетельствует о наличии в плазме неполимеризующихся (заблокированных) фибрин-мономерных комплексов. Их увеличение отмечается при интоксикации организма и ДВС-синдроме.
Определение РФМК в плазме проводится орто-фенантроли-новым тестом по В. А. Еламыкову, А. П. Мамоту (1987). Появление в плазме хлопьев в течение первых 2 мин. после добавления к ней раствора орто-фенантролина свидетельствует о наличии растворимых высокомолекулярных фибрин-мономерных комплексов. Скорость образования хлопьев зависит от концентрации РФМК, что позволяет оценивать количество РФМК в эквиваленте фибрин-мономера. В норме показатели этого теста — не больше 3 — 4 мг/ 100 мл или 3 - 4 г/л- Ю-2 (В. Г. Лычев,1998).
Положительные тесты паракоагуляции свидетельствуют о течении ДВС-синдрома или массивных тромбозах на ранних этапах развития процесса.

Используется унифицированный метод определения толерантности плазмы к гепарину (по F. Gormsen, 1959), основанный на изменении времени рекальцификации плазмы после внесения в нее гепарина. Если после введения гепарина резко увеличивается время образования сгустка, значит толерантность плазмы к гепарину понижена, и наоборот, если гепарин замедлял свертывание плазмы незначительно, толерантность плазмы к гепарину была повышена. Этот тест отражает состояние общей коагуляционной активности крови и содержание в плазме крови антитромбина-Ш (АТ-Ш). Нормальные показатели у здорового человека— 11—16мин.(В. П. Балуда с соавт., 1980). Толерантность плазмы к гепарину снижается до 20 мин. при любом дефиците факторов коагуляции, особенно факторов протромбинообразования, а также при тромбоцитопении, повышении антикоагулянтной активности крови, после введения гепарина, когда у больного достаточно АТ-Ш. Повышение толерантности плазмы к гепарину до 1 — 9 мин. всегда свидетельствует либо о внутрисосудистом свертывании (появлении в кровеносном русле активированных факторов коагуляции), либо о циркуляции в крови тканевого тромбо-пластина, связывающего гепарин, либо об истощении расходуемого на внутрисосудистое свертывание крови АТ-Ш или его врожденном недостатке. Для исследования больных с гипокоагуляцией этот тест применяться не должен.
Исследование должно проводиться натощак, до подъема больного с постели. В норме эуглобулиновый лизис в ответ на компрессию ускоряется в 1,5—2 раза, что свидетельствует о выбросе сосудистых активаторов в кровь (метод И. А. Ойвина и С. И. Чекалиной). При дефиците эндотелиальных активаторов фибринолиза или нарушении их вьщеления в кровь реакция на компрессию резко снижена или отсутствует.
Для оценки фибринолитической активности также используется метод определения спонтанного фибринолиза по М. А. Котовщи-ковой и Б. И. Кузнику (1961), основанный на том, что при растворении фибринового сгустка форменные элементы крови выпадают в осадок. Зная гематокрит исследуемой крови и количество форменных элементов, оставшихся в сгустке, высчитывается фибрино-литическая активность (естественный лизис) в процентах. В норме показатели колеблются от 10 до 20% (Е. П. Иванов, 1983).

Принцип метода заключается в определении времени свертывания цитратной плазмы при добавлении Са2+ в условиях стандартной активации процесса свертывания каолином и кефалином. АПТВ удлиняется при дефиците плазменных факторов, участвующих во внутреннем механизме свертывания крови, либо при избытке в плазме антикоагулянта. Укорочение АПТВ указывает на активацию свертывания крови.

Оценка I фазы свертывания крови — образования протромбиназы.
Время свертывания крови по Lee, White. Этот тест отражает весь процесс свертывания и выявляет только значительные сдвиги в системе гемокоагуляции (норма 5—10 мин.). Укорочение времени свертывания свидетельствует о гиперкоагуляции, а удлинение, напротив — о гипокоагуляции.

Снижение резистентности капилляров к механическим воздействиям может быть обусловлено неполноценностью стенок микрососудов, связанной с инфекционно-токсическими влияниями (сепсис, сыпной тиф и др.), с гиповитаминозом, эндокринными нарушениями (менструальный период, патологический климакс). Но чаще всего оно наблюдается при выпадении ангиотрофической функции тромбоцитов. Методы исследования резистентности капилляров недостаточно точны и стандартизированы. Чаще всего в клинике используются манжеточная проба (Borchgrevik). Внутрисосудистое давление повышают путем дозированного сдавливания плеча манжеткой сфигмоманометра (90—100 мм рт. ст.) в течение 5 мин. Манжетку снимают и ждут 5 мин. После чего подсчитывают количество пете-хий на ладонной поверхности предплечья в круге (d — 5 см). Норма — до 5 петехий, 15—10 проба — слабоположительная, 10—20 — положительная, 20 и больше — резко-положительная.

Принцип основан на определении объема ретрагируемой сыворотки в пробирке. Объем сыворотки, оставшейся после наступления полного свертывания крови, равен 50—75%.
Недостаточная ретракция сгустка наблюдается при выраженных тромбоцитопениях, при неполноценности тромбоцитов, избытке тромбоцитов и увеличении гематокритного показателя.
Для того чтобы иметь представление о причинах тромбоцито-пений, необходимо исследовать состояние родоначальных клеток тромбоцитов-мегакариоцитов. Исследование мегакариоцитар-ного аппарата важно для разграничения гипо- и апластических тромбоцитопений, обусловленных интенсивной гибелью кровяных пластинок, при которых имеется гиперплазия мегакариоци-тарного ростка. Оценка состояния мегакариоцитарного ростка проводится путем исследования пунктатов костного мозга и гистологически с помощью трепанобиопсии. В пунктате костного мозга около 0,2% мегакариоцитов.
Каждый зрелый мегакариоцит образует около 3—4 тыс. тромбоцитов. Количество мегакариоцитов значительно снижается при так называемых гипорегенераторных тромбоцитопениях (гипо- и аплазии костного мозга, лейкозы, опухоли костей, дефицит тром-бопоэтина). Количество мегакариоцитов резко снижается, тогда как при всех иммунных тромбоцитопениях и формах, обусловленных депонированием тромбоцитов (спленомегалия, гигантские гемангиомы, массивное тромбообразование), отмечается выраженная гиперплазия мегакариоцитарного аппарата. Резкое увеличение этих клеток отмечается при миелопролиферативных заболеваниях (эритремии, геморрагической тромбоцитемии и др.).

Кровь непосредственно из вены просасывается через поливиниловую трубку, заполненную стеклянными шариками, после чего в ней определяется убыль тромбоцитов по сравнению с кровью, не прошедшей через такой фильтр. Разница между этими показателями, выраженная в %, отражает степень адгезии (норма 20— 40%). Снижение ее наблюдается при врожденных (наследственных) и симптоматических тромбоцитопатиях в сочетании с различными нарушениями агрегационных функций (тромбастения, уремия, лейкозы и т. д.), либо без них (болезнь Виллебранда).
Своевременная диагностика тромбоцитопатий требует развернутого изучения агрегации тромбоцитов под влиянием следующих агентов: коллагена, АДФ, адреналина, малых доз тромбина, ристоцетина. При графической регистрации процесса агрегации на агрегографе определяется двухволновая кривая, в которой вторая волна связана с выходом из тромбоцитов эндогенных стимуляторов агрегации — АДФ, катохоламинов, тромбоксана и др. Это вторая волна характеризует реакцию высвобождения. Ее нет при отсутствии в тромбоцитах плотных гранул. Начало агрегации с момента добавления стимулятора агрегации в норме — 11—17 мин.
Полное отсутствие или резкое снижение агрегации тромбоцитов наблюдается при различных видах качественной неполноценности тромбоцитов. Изолированное нарушение ристоцетин-агре-гации наблюдается в основном при болезни Виллебранда. Это нарушение обусловлено отсутствием в плазме фактора Виллебранда, в силу чего ристоцетин-агрегация нормализуется после добавления нормальной плазмы (в отличие от болезни Бернара-Сулье, где дефектны сами тромбоциты).
При атеросклерозе, нарушениях коронарного и мозгового кровообращения, сахарном диабете, гиперлипидемиях и других заболеваниях с повышенным тромбогенным риском может наблюдаться чрезмерно высокая АДФ-агрегация тромбоцитов.